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　　2015年12月28日，北京检测云中心接到河北省天津市某养殖场一例产蛋鸡发病的案例。经流行病学调查、病理剖检和实验室诊断，最后确诊为一例禽流感H9混感大肠杆菌的案例。

 

　　1、临床症状

 

　　160日龄的开产鸡群，已免疫3次新流油苗和3次禽流感H5油苗，118日龄免疫新支减流，128天时四系2饮水，140日龄时免疫禽流感H5-6、-7油苗。一个星期前鸡群开始出现零星死亡，但鸡群整体上无明显的精神不振现象，采食量亦无较大的波动，但鸡群里总是出现打蔫的鸡，出现后不久就死亡。就诊前2天每栋5万只的鸡舍每天死亡5-6只鸡，且死亡量逐渐增加，现在每天死亡20多只鸡。大群无明显的呼吸道症状，但鸡群中有个别鸡只拉黄白色粪便。

 

　　2、病理剖检症状

 

　　剖检4只病鸡可见气管环节淤血；肝脏淤血呈紫色；卵泡严重变形呈菜花状，严重者萎缩肉变，输卵管易碎；腺胃、肌胃交界处有出血斑，腺胃乳头出血；盲肠淋巴结肿大出血，十二指肠、空肠、回肠淋巴集结肿大出血，且十二指肠可见明显的出血斑，直肠出血较来重。见附图1。

图1、剖检图片

 

　　3、实验室诊断

 

　　根据临床症状和剖检症状，怀疑鸡群可能由新城疫或者禽流感H9混合感染细菌性疾病引起，因此进行以下实验室检测：

 

　　3.1  检测新城疫和禽流感抗体水平

 

　　160日龄鸡群，随机采集20枚鸡蛋，采用血凝和血抑方法检测新城疫、禽流感H9、H5Re-6、H5Re-7抗体水平，具体数据见表1。由表可知，新城疫和禽流感抗体水平均在临界保护值左右徘徊，抗体水平较均匀。

表1  160日龄新城疫、禽流感抗体水平

 

　　3.2  新城疫和禽流感病原检测

 

　　无菌采集脾脏、卵巢、盲肠淋巴结等病变组织，将上述组织研磨进行分子生物学RT-PCR方法检测，分别检测新城疫和禽流感病毒核酸，结果显示禽流感H9N2病原检测为阳性、新城疫为阴性。如图2。

图2   禽流感H9、新城疫病原检测结果

 

　　3.3 细菌分离结果

 

　　无菌采取肝脏、心脏、脾脏等病料分别划线接种在麦康凯和SS琼脂上，37℃培养12h，在麦康凯平板上可见桃红色圆润突起的菌落，挑取单个菌落镜检，在显微镜下观察为革兰氏阴性的短小杆菌，判断为大肠杆菌；大SS琼脂上可见乳白色的菌落，镜检可见革兰氏阴性的短小杆菌；经生化试验判断此菌为大肠杆菌非沙门氏菌。见图3。

图3、细菌分离结果

 

　　3.4  药敏试验结果

 

　　无菌采取肝脏、心脏、脾脏等处病料分别进行细菌分离37℃培养12h，用菌液进行药敏实验，此菌对多西环素、头孢他啶、硫酸粘菌素、杆菌必克中敏；肠安泰、硫酸新霉素、庆大霉素高敏；硫酸阿米卡星极敏。见附表2。

 

表2  药敏试验结果

 

　　4、诊断结果分析及建议

 

　　根据临床症状、剖检症状和实验室诊断，最后确诊此次鸡群发病是由禽流感H9N2混合感染大肠杆菌引起。治疗措施：在饲料中添加清瘟解毒中药和黄芪多糖成份的药物，抗病毒和提高机体的抵抗力，连用5天；同时水中加入硫酸新霉素每天集中饮用一次，连用5天。对于大群，每天清两次粪便，同时用两种消毒液每天交替对舍内舍外进行消毒，每天1－2次，连续一个星期。